王佳宁出生于吉林省辽源市，从小就学习音乐，毕业于北京现代音乐研修学院。2006年，参加湖南卫视选秀娱乐节目《超级女声》，获得长沙唱区亚军，全国第20名；同年，签约北京天浩盛世文化传媒公司，正式出道。

2007年，发行个人首张专辑《宁静的夏天》，获得MusicRadio中国TOP排行榜内地新人奖。2008年，发行第二张专辑《感动的瞬间》，获得MusicRadio中国TOP排行榜年度金曲奖。2009年，发行第三张专辑《生命的奇迹》，获得东方风云榜年度新人奖。

2010年，王佳宁主演了青春偶像剧《一起来看流星雨》，饰演于馨一角，受到观众的喜爱。2011年，主演了都市情感剧《克拉恋人》，饰演米朵一角，再次受到观众的关注。2012年，主演了古装爱情剧《花非花雾非雾》，饰演白梦华一角，演技再次得到肯定。

2013年，王佳宁主演了都市情感剧《幸福绽放》，饰演林晓雪一角，该剧获得中国电视剧飞天奖优秀电视剧奖。2014年，主演了都市情感剧《美丽的秘密》，饰演阮清恬一角，该剧获得中国电视剧金鹰奖优秀电视剧奖。2015年，主演了都市情感剧《如果爱》，饰演文晓华一角，该剧获得中国电视剧白玉兰奖优秀电视剧奖。

2016年，王佳宁主演了古装爱情剧《清宫熹妃传》，饰演魏璎珞一角，该剧获得中国电视剧金鹰奖优秀电视剧奖。2017年，主演了都市情感剧《我的前半生》，饰演罗子君一角，该剧获得中国电视剧白玉兰奖优秀电视剧奖。2018年，主演了古装爱情剧《延禧攻略》，饰演魏璎珞一角，该剧获得中国电视剧金鹰奖优秀电视剧奖。

2019年，王佳宁主演了都市情感剧《都挺好》，饰演苏明玉一角，该剧获得中国电视剧白玉兰奖优秀电视剧奖。2020年，主演了古装爱情剧《锦绣南歌》，饰演谢韫之妻陆婉一角，该剧获得中国电视剧金鹰奖优秀电视剧奖。2021年，主演了都市情感剧《小舍得》，饰演南俪一角，该剧获得中国电视剧白玉兰奖优秀电视剧奖。